HIPRA SAÚDE ANIMAL LTDA.
Suíno
Fórmula:
Conteúdo do kit: 5 microplacas com 96 cavidades cada 2 frascos (100 mL) de solução de lavagem (10x) 1 frasco (100 mL) de solução diluente de amostras (3x) e corante verde 1 frasco (30 mL) de solução de conjugado (solução de Mab anti IgGs suínas/HRPO com corante vermelho) 1 frasco (30 mL) de solução de substrato com ABTS 1 frasco (30 mL) de solução bloqueadora ácido oxálico 1 frasco (2,2 mL) de soro controle positivo com corante amarelo 1 frasco (2,2 mL) com soro controle negativo com corante azul Adesivos
Indicações:
É um teste ELISA para detecção de anticorpos específicos contra Actinobacillus pleuropneumoniae em soros de suínos. CIVTEST SUIS APP é um teste baseado em um imunoensaio enzimático indireto. Duas proteínas purificadas (ApxI e Tbp2) específicas de Actinobacillus pleuropneumoniae estão impregnadas nas 96 cavidades da microplaca. Durante a incubação inicial da amostra diluída na cavidade, os anticorpos específicos contra ApxI e/ou Tbp2 de A. pleuropneumoniae se unem aos antígenos adsorvidos nas cavidades ficando retidos no mesmo durante o processo de lavagem. Em continuação, adiciona-se uma solução de conjugado que se une aos anticorpos suínos retidos na cavidade. Posteriormente, lava-se o excesso de conjugado que não ficou retido e se adiciona um substrato cromogênico específico da peroxidase. A conseqüente aparição de cor em cada cavidade é proporcional à quantidade de anticorpos específicos de ApxI e /ou Tbp2 A. pleuropneumoniae na amostra. A epidemiologia da pleuropneumonia está diretamente relacionada com a industrialização da produção suína. Actinobacillus pleuropneumoniae é o agente etiológico causador da doença. Até o momento foram diferenciados 12 sorotipos diferentes, pertencentes à biovariedade (NAD dependente). Atualmente é possível prevenir a infecção através do uso de vacinas, porém tal prática requer o desenvolvimento de ensaios sorológicos eficazes que permitam determinar tanto a presença como a porta de entrada e a circulação de A. pleuropneumoniae nas criações.
Dosagem:
Preparação dos reagentes e amostras: Solução de lavagem diluída: adicionar 1 volume da solução de lavagem (10x) em 9 volumes de água destilada ou deionizada. Recomenda-se utilizar dentro de 7 dias. Solução diluente de amostras diluída: adicionar 1 volume de solução diluente de amostras (3x) em 2 volumes de água destilada ou deionizada. Recomenda-se utilizar dentro de 2 dias. Os controles positivo e negativo estão prontos para uso e não requerem diluição. A amostra de soro deve ser diluída a 1:200 em solução diluente de amostras diluída.
Administração:
Teste: Deixar todos os reagentes estabilizarem à temperatura ambiente e assegurar que estão misturados com suave inversão do frasco. Anotar a posição das amostras e controle em uma folha (os controles positivo e negativo devem ser sempre analisados em duplicata). Remover o adesivo plástico e adicionar os controles e amostras nas cavidades apropriadas. Cobrir a placa com adesivo e incubar por 60 minutos a 37ºC. Retirar o adesivo e realizar 3 lavagens na placa com a solução lavagem diluída. Inverter a placa e bater firmemente sobre papel absorvente. Adicionar a solução conjugado em cada cavidade. Cobrir a placa com adesivo e incubar por 60 minutos a 37ºC. Retirar o adesivo e realizar 3 lavagens na placa com a solução lavagem diluída. Inverter a placa e bater firmemente sobre papel absorvente. Adicionar a solução substrato em cada cavidade. Agitar a placa suavemente durante 2 segundos. Desenvolver a reação cromogênica por 15 minutos à temperatura ambiente (20ºC a 25ºC) no escuro. Adicionar a solução bloqueadora em cada cavidade. Homogeneizar batendo levemente na lateral da placa. Limpar a superfície inferior da placa com papel absorvente. Ler a placa em leitora de ELISA utilizando filtro de 405 nm, realizando previamente um branco com ar. Resultados: O teste é válido se a DO405 média do controle positivo é > 0,9 e a relação DO405 média do controle positivo/ DO405 média do controle negativo é > 5,0. Para interpretação dos resultados, é preciso obter o valor de IRPC (Índice Relativo x 100). Negativo: valor de IRPC < 20,0 Positivo: valor de IRPC > 20,0
Precauções:
Ler cuidadosamente o manual de instruções ou bula. Conservar os reagentes entre 2ºC e 8ºC. Não congelar. Conservar as placas não utilizadas fechadas no envelope plástico com a sílica, evitando exposição à umidade que pode danificá-las. Apesar do antígeno ser inativado quimicamente durante o processo de fabricação, as placas contendo antígenos devem ser consideradas uma fonte de APP. Não expor a solução de substrato a fontes de luz intensa ou agentes oxidantes. O ABTS é muito sensível a qualquer mistura ou contaminação, portanto não devolver ao frasco uma vez retirado. Há um excedente de 25% no frasco permitindo uma pequena perda a cada utilização. Após longos períodos de armazenamento a 4ºC é possível que se formem cristais nas formas concentradas tanto da solução de lavagem quanto da solução diluente de amostras. Para utilizar todo o volume do frasco concentrado de uma só vez, simplesmente agitando-o por inversão várias vezes é suficiente para reconstituí-lo. Para reconstituir somente uma parte do volume (que será utilizado) é preciso assegurar que os cristais estejam totalmente dissolvidos antes de preparar a diluição. Para acelerar este processo, pode-se submergir o frasco em banho-maria de 28 a 37ºC durante 10 a 15 minutos. Para evitar o aparecimento de cristais na solução de lavagem concentrada, esta pode ser armazenada a temperatura ambiente durante toda a validade do kit. Não utilizar nenhum reagente após a data de validade nem misturar os reagentes de diferentes lotes de kit. Para manter a precisão é necessário realizar a pipetagem e as lavagens de forma cuidadosa. Não pipetar os reagentes com a boca. Utilizar luvas durante o processo. A solução bloqueadora é um ácido orgânico tóxico e pode ser corrosivo. Todos os materiais devem ser corretamente desinfetados com sabão ou outro desinfetante antes de serem descartados. Esse kit é apenas para uso veterinário.
Apresentação:
Um kit é suficiente para o máximo de 460 ensaios.
Classe Terapêutica:
DIAGNÔSTICOS
Princípio(s) Ativo(s):
ANTÍGENOS, KITS DE DETECÇÃO E TESTES
Registro no Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento:
Licenciado no MAPA sob nº. 8386 em 13/11/2002
Responsável Técnico:
Claudio Chiminazzo - CRMV: RS 04137
Serviço de Atendimento ao Consumidor:
08006444501
Suíno
Fórmula:
Conteúdo do kit: 5 microplacas com 96 cavidades cada 2 frascos (100 mL) de solução de lavagem (10x) 1 frasco (100 mL) de solução diluente de amostras (3x) e corante verde 1 frasco (30 mL) de solução de conjugado (solução de Mab anti IgGs suínas/HRPO com corante vermelho) 1 frasco (30 mL) de solução de substrato com ABTS 1 frasco (30 mL) de solução bloqueadora ácido oxálico 1 frasco (2,2 mL) de soro controle positivo com corante amarelo 1 frasco (2,2 mL) com soro controle negativo com corante azul Adesivos
Indicações:
É um teste ELISA para detecção de anticorpos específicos contra Actinobacillus pleuropneumoniae em soros de suínos. CIVTEST SUIS APP é um teste baseado em um imunoensaio enzimático indireto. Duas proteínas purificadas (ApxI e Tbp2) específicas de Actinobacillus pleuropneumoniae estão impregnadas nas 96 cavidades da microplaca. Durante a incubação inicial da amostra diluída na cavidade, os anticorpos específicos contra ApxI e/ou Tbp2 de A. pleuropneumoniae se unem aos antígenos adsorvidos nas cavidades ficando retidos no mesmo durante o processo de lavagem. Em continuação, adiciona-se uma solução de conjugado que se une aos anticorpos suínos retidos na cavidade. Posteriormente, lava-se o excesso de conjugado que não ficou retido e se adiciona um substrato cromogênico específico da peroxidase. A conseqüente aparição de cor em cada cavidade é proporcional à quantidade de anticorpos específicos de ApxI e /ou Tbp2 A. pleuropneumoniae na amostra. A epidemiologia da pleuropneumonia está diretamente relacionada com a industrialização da produção suína. Actinobacillus pleuropneumoniae é o agente etiológico causador da doença. Até o momento foram diferenciados 12 sorotipos diferentes, pertencentes à biovariedade (NAD dependente). Atualmente é possível prevenir a infecção através do uso de vacinas, porém tal prática requer o desenvolvimento de ensaios sorológicos eficazes que permitam determinar tanto a presença como a porta de entrada e a circulação de A. pleuropneumoniae nas criações.
Dosagem:
Preparação dos reagentes e amostras: Solução de lavagem diluída: adicionar 1 volume da solução de lavagem (10x) em 9 volumes de água destilada ou deionizada. Recomenda-se utilizar dentro de 7 dias. Solução diluente de amostras diluída: adicionar 1 volume de solução diluente de amostras (3x) em 2 volumes de água destilada ou deionizada. Recomenda-se utilizar dentro de 2 dias. Os controles positivo e negativo estão prontos para uso e não requerem diluição. A amostra de soro deve ser diluída a 1:200 em solução diluente de amostras diluída.
Administração:
Teste: Deixar todos os reagentes estabilizarem à temperatura ambiente e assegurar que estão misturados com suave inversão do frasco. Anotar a posição das amostras e controle em uma folha (os controles positivo e negativo devem ser sempre analisados em duplicata). Remover o adesivo plástico e adicionar os controles e amostras nas cavidades apropriadas. Cobrir a placa com adesivo e incubar por 60 minutos a 37ºC. Retirar o adesivo e realizar 3 lavagens na placa com a solução lavagem diluída. Inverter a placa e bater firmemente sobre papel absorvente. Adicionar a solução conjugado em cada cavidade. Cobrir a placa com adesivo e incubar por 60 minutos a 37ºC. Retirar o adesivo e realizar 3 lavagens na placa com a solução lavagem diluída. Inverter a placa e bater firmemente sobre papel absorvente. Adicionar a solução substrato em cada cavidade. Agitar a placa suavemente durante 2 segundos. Desenvolver a reação cromogênica por 15 minutos à temperatura ambiente (20ºC a 25ºC) no escuro. Adicionar a solução bloqueadora em cada cavidade. Homogeneizar batendo levemente na lateral da placa. Limpar a superfície inferior da placa com papel absorvente. Ler a placa em leitora de ELISA utilizando filtro de 405 nm, realizando previamente um branco com ar. Resultados: O teste é válido se a DO405 média do controle positivo é > 0,9 e a relação DO405 média do controle positivo/ DO405 média do controle negativo é > 5,0. Para interpretação dos resultados, é preciso obter o valor de IRPC (Índice Relativo x 100). Negativo: valor de IRPC < 20,0 Positivo: valor de IRPC > 20,0
Precauções:
Ler cuidadosamente o manual de instruções ou bula. Conservar os reagentes entre 2ºC e 8ºC. Não congelar. Conservar as placas não utilizadas fechadas no envelope plástico com a sílica, evitando exposição à umidade que pode danificá-las. Apesar do antígeno ser inativado quimicamente durante o processo de fabricação, as placas contendo antígenos devem ser consideradas uma fonte de APP. Não expor a solução de substrato a fontes de luz intensa ou agentes oxidantes. O ABTS é muito sensível a qualquer mistura ou contaminação, portanto não devolver ao frasco uma vez retirado. Há um excedente de 25% no frasco permitindo uma pequena perda a cada utilização. Após longos períodos de armazenamento a 4ºC é possível que se formem cristais nas formas concentradas tanto da solução de lavagem quanto da solução diluente de amostras. Para utilizar todo o volume do frasco concentrado de uma só vez, simplesmente agitando-o por inversão várias vezes é suficiente para reconstituí-lo. Para reconstituir somente uma parte do volume (que será utilizado) é preciso assegurar que os cristais estejam totalmente dissolvidos antes de preparar a diluição. Para acelerar este processo, pode-se submergir o frasco em banho-maria de 28 a 37ºC durante 10 a 15 minutos. Para evitar o aparecimento de cristais na solução de lavagem concentrada, esta pode ser armazenada a temperatura ambiente durante toda a validade do kit. Não utilizar nenhum reagente após a data de validade nem misturar os reagentes de diferentes lotes de kit. Para manter a precisão é necessário realizar a pipetagem e as lavagens de forma cuidadosa. Não pipetar os reagentes com a boca. Utilizar luvas durante o processo. A solução bloqueadora é um ácido orgânico tóxico e pode ser corrosivo. Todos os materiais devem ser corretamente desinfetados com sabão ou outro desinfetante antes de serem descartados. Esse kit é apenas para uso veterinário.
Apresentação:
Um kit é suficiente para o máximo de 460 ensaios.
Classe Terapêutica:
DIAGNÔSTICOS
Princípio(s) Ativo(s):
ANTÍGENOS, KITS DE DETECÇÃO E TESTES
Registro no Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento:
Licenciado no MAPA sob nº. 8386 em 13/11/2002
Responsável Técnico:
Claudio Chiminazzo - CRMV: RS 04137
Serviço de Atendimento ao Consumidor:
08006444501